PCR實驗室潔淨工程-PCR實驗室必威betway最新官网
PCR實驗室潔淨工程(PCR實驗室淨化工程裝修、實驗室淨化設備)PCR實驗室從(cong) 設計到管理全攻略（承接實驗室潔淨工程）一般三級醫院都擁有標準PCR實驗室與(yu) 具備核酸檢測的能力。而此次對二級醫院也提出同樣要求，意味著二級醫院也需要配備PCR實驗室。根據我國最新數據，截止2019年2月底我國三級醫院2582所，二級醫院9061所，一級醫院10084所。PCR實驗室建設的熱潮。本文就PCR實驗室設計、裝修，相關(guan) 儀(yi) 器設備，人員配置及管理做了如下總結，供大家交流學習(xi) 。
PCR實驗室裝修-PCR實驗室淨化工程為(wei) 例（PCR即聚合酶鏈式反應），是分子生物學研究和實驗的常規方法，也是生物學、醫學臨(lin) 床等領域廣泛應用的實驗技術。其特點是能將微量的DNA大幅增加，實驗室通常分為(wei) 四個(ge) 區域，即：試劑儲(chu) 存和準備區、標本製備區、擴增反應混合物配製和擴增區、擴增產(chan) 物分析區（如使用全自動分析儀(yi) ，區域可適當合並）。進入各個(ge) 區域嚴(yan) 格按照單一方向進行，不同的工作區域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開時，不得將工作服帶出。
試劑儲(chu) 存和準備室（標本製備區），儀(yi) 器主要配置有：冷凍離心機、生物安全櫃、冰箱、可移動紫外燈、全自動力核酸蛋白純化儀(yi) 、專(zhuan) 用工作服和工作鞋等。擴增反應混合物配製和擴增區配置有：冰箱、高速離心機、超淨工作台、PCR儀(yi) （要求負壓狀態）、可移動紫外燈、微量加樣器、核酸擴增儀(yi) 等。擴增產(chan) 物分析區主要配置有：移液器、振蕩器、超淨工作台、毛細管電泳儀(yi) 、冰箱、離心機、微量加樣器、可移動紫外燈等。
潔淨室一般實施兩(liang) 級隔離，隔離通過生物安全櫃、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實現；
二級隔離通過實驗室的建築、空調淨化和電氣控製係統來實現。但由於(yu) 淨化空調需要風量小為(wei) 了安全起見，風量都按大的估算，一般都要超過規範規定，物別是百級以上，冷熱負荷在要求不是很嚴(yan) 格的情況可能估算，現在專(zhuan) 門有淨化空調機組，可以直接利用。
二級~四級生物安全實驗室應實施兩(liang) 級隔離。一般實驗室裝備有:超淨工作台、生物安全櫃、邊台或不鏽鋼操作台、洗滌台等。
PCR實驗室設計方案如下所示：
場地要求及實驗室設計及場地要求一般參照以下文件：
《醫療機構管理條例》
《醫療機構臨(lin) 床實驗室管理辦法》
《臨(lin) 床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》
《醫療機構臨(lin) 床基因擴增實驗室管理辦法》
標準的PCR實驗室一般分為(wei) 四個(ge) 區，一區為(wei) 試劑準備區，二區為(wei) 標本製備區，三區為(wei) PCR擴增區，四區為(wei) 產(chan) 物分析區。為(wei) 避免交叉汙染，進入各個(ge) 工作區域必須嚴(yan) 格遵循單一方向進行，即隻能從(cong) 試劑貯存和準備區→標本製備區→擴增反應混合物配製和擴增區→擴增產(chan) 物分析區。各實驗區之間的試劑及樣品傳(chuan) 遞應通過傳(chuan) 遞窗進行。
場地一般要求在80平米以上，此標準PCR實驗室可開展包括新冠病毒在內(nei) 的常規分子檢測項目。而如今市麵上絕大部分新冠病毒檢測試劑盒是在熒光定量PCR平台上開發的，因此沒有產(chan) 物分析區也不會(hui) 影響新冠病毒的檢測，60-80平米的場地就能滿足要求，但是其他如基於(yu) 一代測序與(yu) 基因芯片的檢測項目就無法開展。
PCR實驗室的場地限製條件較多，且因時間要求更為(wei) 緊迫，部分醫院可能連50平米的場地都無法提供，為(wei) 了能盡快滿足各醫院的新冠病毒檢測需求，一個(ge) 非常緊湊的PCR實驗室可以將空間設計在僅(jin) 為(wei) 35平米左右，但是其防汙染能力較差，小編不推薦。
不管是幾個(ge) 區，可將PCR過程分成試劑準備、標本製備和PCR擴增檢測三個(ge) 獨立組成。整個(ge) 區域有一個(ge) 整體(ti) 緩衝(chong) 走廊。每個(ge) 獨立實驗區設置有緩衝(chong) 區，同時各區通過氣壓調節，使整個(ge) PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的汙染並降低擴增產(chan) 物對人員和環境的汙染。PCR實驗室一定在三個(ge) 實驗區和三個(ge) 緩衝(chong) 區頂部以及傳(chuan) 送窗內(nei) 部安裝有紫外燈，供消毒用。在試劑準備區和標本製備區還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。
試劑和標本通過機械連鎖不鏽鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳(chuan) 遞窗傳(chuan) 遞，保證試劑和標本在傳(chuan) 遞過程中不受汙染（人物分流）。
地麵建議使用PVC卷材地麵或自流坪地麵，整體(ti) 性好，便於(yu) 進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地麵，或大塊的瓷磚，瓷磚間接縫需要小於(yu) 2mm。
PCR實驗室空調通風係統設計及壓力控製
PCR實驗室並沒有嚴(yan) 格的淨化要求，但是為(wei) 避免各個(ge) 實驗區域間交叉汙染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴(yan) 格控製送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。
1、試劑貯存和準備區
該實驗區主要進行的操作為(wei) 貯存試劑的製備、試劑的分裝和主反應混合液的製備。試劑和用於(yu) 標本製作的材料應直接運送至該區，不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內(nei) ，並在本區內(nei) 製備成所需的貯存試劑。
對與(yu) 氣流壓力的控製，本區並沒有嚴(yan) 格的要求。
2、標本製備區
該區域主要進行的操作為(wei) 臨(lin) 床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。
本區的壓力梯度要求為(wei) ：相對於(yu) 鄰近區域為(wei) 正壓，以避免從(cong) 鄰近區進入本區的氣溶膠汙染。另外，由於(yu) 在加樣操作中可能會(hui) 發生氣溶膠所致的汙染，所以應避免在本區內(nei) 不必要的走動。
3、擴增反應混合物配製和擴增區
該區域主要進行的操作為(wei) DNA或cDNA擴增。此外，已製備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本製備區) 的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和製備區) 製備成反應混合液等也可在本區內(nei) 進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增後必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的汙染危險性，第二次加樣必須在本區內(nei) 進行。
本區的壓力梯度要求為(wei) ：相對於(yu) 鄰近區域為(wei) 負壓，以避免氣溶膠從(cong) 本區漏出。為(wei) 避免氣溶膠所致的汙染，應盡量減少在本區內(nei) 的不必要的走動。個(ge) 別操作如加樣等應在超淨台內(nei) 進行。
4、擴增產(chan) 物分析區
該區域主要進行的操作為(wei) 擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀(yi) 器檢測，此區域可不設。
本區是最主要的擴增產(chan) 物汙染來源，因此對本區的壓力梯度的要求為(wei) ：相對於(yu) 鄰近區域為(wei) 負壓，以避免擴增產(chan) 物從(cong) 本區擴散至其它區域。
PCR實驗室汙染的預防與(yu) 控製
PCR實驗室設計的核心問題是如何避免汙染。在實際工作中，常見的有以下幾種汙染類型：擴增產(chan) 物的汙染；天然基因組DNA的汙染；試劑的汙染以及標本間的汙染。由於(yu) 一旦發生汙染，實驗就必須停止，直到找到汙染源為(wei) 止，而且實驗結果必須作廢，需重新進行實驗。所以發生汙染後再圍繞實驗室來尋找汙染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免汙染，首先應是預防，而不是排除。
1、工作區域的嚴(yan) 格劃分
（1）各個(ge) 實驗區域設置合理；
（2）各個(ge) 實驗區域要有明顯的標記（如醒目的門牌或不同的地麵顏色等），以避免各個(ge) 不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。
2、合理的係統設置
（1）合理的空調通風係統設置，盡量采用全送全排的空調係統；
（2）嚴(yan) 格的氣流壓力控製，保證不同的實驗區內(nei) 不同的壓力要求。
3、規範的操作
（1）臨(lin) 床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，經培訓合格後才能從(cong) 事臨(lin) 床基因擴增檢驗的工作；
（2）在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，並經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個(ge) 有效地防止汙染的措施；
（3）清潔工作及時、正確。實驗工作結束後，必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體(ti) 對表麵進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。
4、嚴(yan) 格的管理
（1）嚴(yan) 格控製進出實驗室的人員。與(yu) 實驗無關(guan) 的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個(ge) 實驗區的門；
（2）在各個(ge) 實驗區域使用帶有明顯區別標誌的工作服（如不同顏色），當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域；
（3）盡量減少在實驗區內(nei) 不必要的走動以減少交叉汙染的可能性。
（4）擴增產(chan) 物分析區是最主要的擴增產(chan) 物汙染來源，廢液不能在實驗室中傾(qing) 倒，必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒後統一處理，如焚燒等；
（5）擴增產(chan) 物分析區可能會(hui) 用到某些可致基因突變和有*物質，應特別注意實驗人員的安全防護。
5、完備的實驗室配套設施
完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據各個(ge) 實驗室實驗內(nei) 容的不同配備相應的設備和儀(yi) 器，如超淨工作台、離心機、加樣器等。
PCR實驗室主要設備見下表
本表所列儀(yi) 器為(wei) 滿足新冠病毒檢測所需的最低配置，空調排風係統等不算在內(nei) 。
PCR實驗室質量控製
為(wei) 實現高質量的檢測結果，采取嚴(yan) 格的實驗室管理體(ti) 係極為(wei) 重要
根據實驗室的具體(ti) 情況製定和編寫(xie) 質量體(ti) 係文件，《質量手冊(ce) 》、《程序文件》、《作業(ye) 指導書(shu) 》，並嚴(yan) 格執行。
管理體(ti) 係的特點是應有明確的目的、規範的管理、有效的製約、高效並自我調節的機製，具體(ti) 要求如下：
建立完善的SOP文件，對完成各項質量活動的方法作出規定，每個(ge) SOP都應對一個(ge) 或一組相互關(guan) 係的活動進行描述。
每個(ge) SOP文件應說明該項質量各環節的輸入、轉換和輸出所需的文件、物資、人員、記錄以及它們(men) 與(yu) 有關(guan) 活動的接口關(guan) 係。
明確每個(ge) 環節轉換過程中各項因素的要求，即由誰做、做什麽(me) 、做到什麽(me) 程序、達到什麽(me) 要求，如何控製、形成什麽(me) 記錄和報告，以及相應的審批手續。
規定在質量活動中需要注意的例外或特殊情況的糾正措施。SOP應簡練、明確和易懂並且工作人員熟練掌握和嚴(yan) 格遵守。
盡量減少在實驗區內(nei) 不必要的走動以減少交叉汙染的可能性。擴增產(chan) 物分析區是最主要的擴增產(chan) 物汙染來源，廢液必須經消毒液浸泡後在遠離實驗室的地方棄掉，用過的一次性材料也應經消毒液浸泡後統一處理。
用到某些有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件。
人員配置
為(wei) 保障實驗室的正常運行需要1名副高職稱以上的檢驗技術人員，2名中級職稱以上的檢驗技術人員，目前對新冠病毒檢測能力需求迫切，但是一個(ge) 高質量PCR實驗室的建設也不是在朝夕之間能完成。
PCR實驗室設計方案及實驗室裝修工程要求:
1、主體(ti) 結構：
主體(ti) 為(wei) 彩鋼板、鋁（Al)合金(熔點660)型材。室內(nei) 所有陰角、陽角均采用鋁合金
50內(nei) 圓角鋁（Al)，從(cong) 而解決(jue) 容易汙染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。
2、標準的四區分隔和氣壓調節：
將PCR過程分成試劑準備、標本製備和PCR擴增，產(chan) 物分析(Analyse)四個(ge) 獨立的實驗區。淨化實驗室控製係統是整個(ge) 潔淨實驗室安全運行的神經中樞,由於(yu) 潔淨實驗室-生物安全實驗室的實驗對象是危險性的微生物，出於(yu) 嚴(yan) 格控製汙染的原則，它要求以最少的維護人員，運用最優(you) 化的管理維護手段，來實時監控每一個(ge) 實驗室中設備所處的物理環境，保證實驗室運行過程中始終處於(yu) 相對負壓環境，防止危險性微生物外泄。整個(ge) 區域有一個(ge) 整體(ti) 緩衝(chong) 走廊。每個(ge) 獨立實驗區設置有緩衝(chong) 區，同時各區通過氣壓調節，使整個(ge) PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的汙染並降低擴增產(chan) 物對人員和環境的汙染。
可打開緩衝(chong) 區，緩衝(chong) 區和PCR擴增區的排風扇往外排氣，在實驗區的外牆上和各扇門上都安裝有風量(定義(yi) :單位時間內(nei) 空氣的流通量)可調的回風口，空氣通過回風口向室內(nei) 換氣。
3、消毒：
在三個(ge) 實驗區和三個(ge) 緩衝(chong) 區頂部以及傳(chuan) 送窗內(nei) 部安裝有紫外燈，供消毒用。潔淨實驗室無菌試驗室、生物安全實驗室必須保證人身安全、環境安全、廢棄物安全和樣本安全，能長期而安全地運行，同時還為(wei) 需要實驗室工作人員提供一個(ge) 舒適、而良好的工作環境。
在試劑準備區和標本製備區還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。
4、不鏽鋼(不鏽耐酸鋼)傳(chuan) 遞窗：
試劑和標本通過機械連鎖不鏽鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳(chuan) 遞窗傳(chuan) 遞，保證試劑和標本在傳(chuan) 遞過程中不受汙染（人物分流）。
5、地麵
地麵建議使用聚氯乙烯卷材地麵或自流坪地麵，整體(ti) 性好。便於(yu) 進行清掃，耐腐蝕(釋義(yi) :指腐爛、消失、侵蝕等)。